本技术属于无菌分装领域，具体涉及一种载体液无菌分装系统及其应用。
背景技术：
1、生物制品生产之后，受客观环境如光线、温度、空气、水分以及微生物等因素的影响，将逐渐变质。对制备得到的生物制品进行合理的分装和包装可防止各种外界因素对产品质量的影响。
2、病毒载体液的生产具有生产批量小、储存温度低、对包装容器的要求高等特点，因此获得产品后还需要进行分装、轧盖处理。目前一般采用传统手工分装的方式，所用的包装通常是手动，传统手工分装方式存在一定的缺陷：操作复杂，易污染，且生产速度较慢；对产品装量不够精密，易出现漏装及重复分装的差错；密封性受个体操作差异影响大。
3、尽管现有技术中已有基于传统方法进行改进的记载，例如cn110745761a公开了设有电动分液器以及电动旋盖器的无菌隔离器。然而在使用该隔离器对产品进行分装时需要将装有产品的容器连同所有的分装工具一起进行灭菌，灭菌时间长且气体会对产品的质量产生影响。
4、发明详述
5、尽管本技术将在以下公开多个方面和实施方式，但是在不违背本技术主题精神和范围的前提下，本领域技术人员显然可以对其进行各种等同改变和修改。本技术公开的多个方面和实施方式仅用于举例说明，其并非旨在限制本技术，本技术的实际保护范围以权利要求为准。除非另外指出，本文中使用的所有技术和科学术语均具有与本技术所属领域中的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本技术中引用的所有参考文献、专利、专利申请均通过整体引用并入本文。
6、定义
7、本技术中使用的术语“快速传递接口”或者“快速传输端口”的英文全称为rapidtransfer port、简称为rtp，其是一种双门传输系统，由两个主要部件α阀(flange)和β组件(或β阀)组成。其中，α阀通常安装在密闭式环境的侧壁上，β组件是可移动的，并连接到容器、袋或工艺组件上。
8、本技术中使用的术语“β袋”为无菌状态，主要用于在灌装过程中将位于其中的、灭过菌的灌装针无污染地转运到无菌隔离器的灌装单元中进行灌装。
9、本技术中使用的术语“sartorius无菌快速转移系统”，其英文全称为sartoriusaseptic rapid transfer system、简称为sart系统，为快速传递接口(rtp)的一种，可使隔离器保持完整，对液体(如载体液)进行无菌转移。在一些实施方式中，sart系统由一个外接口，一个内接口，和一个一次性的连接装置组成。
10、本技术中使用的术语“蠕动泵”是由驱动器、泵头和软管组成，其通过对泵的弹性输送软管交替进行挤压和释放来泵送流体。
11、本技术中的术语“载体”是指可将遗传元件操作性地插入其中并使该遗传元件获得表达的一种运载工具，例如生产由该遗传元件编码的蛋白质、rna或dna，或者复制所述遗传元件。载体可用于转化、转导或转染宿主细胞，使其携带的遗传元件在宿主细胞内得以表达。举例来说，载体包括：质粒、噬菌粒、柯斯质粒(cosmid)、人工染色体如酵母人工染色体(yac)、细菌人工染色体(bac)或p1衍生的人工染色体(pac)、噬菌体如λ噬菌体或m13噬菌体，以及动物病毒等。本技术的某些实施方式中，所述载体为病毒载体，例如慢病毒载体(lvv)或者腺病毒载体(avv)。在某些实施方式中，所述载体为质粒载体。
12、载体液无菌分装系统
13、在一个方面，本技术提供了一种载体液无菌分装系统，其包括一次性灌装单元和无菌隔离器，所述一次性灌装单元和所述无菌隔离器通过快速传递接口(rapid transferport,rtp)连接。
14、一次性灌装单元
15、本文所述一次性灌装单元依次设有储液装置(1)、缓冲装置(2)以及β袋(3)，并通过管路串联；所述管路的末端(43)设有灌装针(5)，且所述末端管路(43)连同灌装针(5)嵌套于所述β袋(3)中，所述β袋(3)为全封闭状态；所述β袋(3)附接有所述rtp的β组件(31)，当进行灌装时，所述管路末端(43)通过rtp进入所述无菌隔离器。
16、在某些实施方式中，本文所述的储液装置(1)、缓冲装置(2)以及β袋(3)通过管路串联。液体通过进样管路(41)进入储液装置(1)，储液装置(1)与缓冲装置(2)通过连接管路(42)串联，缓冲装置(2)的液体经末端管路(43)流出。其中进样管路(41)、连接管路(42)和末端管路(43)分别设置有管夹以控制管路的开/闭。
17、本技术中的所述储液装置可为本领域常规的形式，例如储液袋、储液罐或者储液箱。在某些实施方式中，所述储液装置为储液袋。
18、在某些实施方式中，所述缓冲装置上设有液位控制系统(12)。所述液位控制系统可有效维持所述缓冲单元中的液位，提高灌装精度。本技术中的所述液位控制系统可为本领域常规的液位控制系统，例如市售可得的液位控制器、无限液位控制系统等。在某些实施方式中，所述液位控制系统通过对所述缓冲装置的称重给出信号，来自动控制(例如控制蠕动泵)补液，以保证所述缓冲装置内的液位维持在一个定值，减少人员手动补液操作。
19、本技术中的所述缓冲装置可为本领域中的常规形式，例如缓冲袋、缓冲罐或者缓冲箱，用以调整灌装压力避免影响灌装精度。在某些实施方式中，所述缓冲装置为缓冲袋。
20、本技术中，所述末端与所述β袋的连接处(44)采用焊接、胶黏或者其他封口方式以实现所述全封闭的状态。在某些实施方式中，所述末端与所述β袋的连接处连用焊接的方式连接。
21、在某些实施方式中，所述β袋为无菌β袋，例如一次性无菌β袋。
22、在某些实施方式中，所述β袋(3)附接有所述rtp的β组件，如β阀(31)当进行灌装时，所述管路末端(43)通过由β阀(31)组成的rtp进入所述无菌隔离器。
23、在某些实施方式中，所述储液装置和所述缓冲装置通过无菌连接器(45)连接。
24、在某些实施方式中，所述一次性灌装单元中还设有第一蠕动泵(131)，按照连接顺序所述第一蠕动泵(131)位于所述储液装置的下游，所述缓冲装置的上游。
25、在某些实施方式中，所述一次性灌装单元中还设有管路气泡监测装置(14)，按照连接顺序所述管路气泡监测装置位于所述储液装置的下游，所述缓冲装置的上游；当所述一次性灌装单元中设有蠕动泵时，所述管路气泡监测装置位于所述蠕动泵的下游。
26、在某些实施方式中，所述rtp为sartorius无菌快速转移(sartorius asepticrapid transfer,sart)系统。
27、无菌隔离器
28、在某些实施方式中，所述的无菌隔离器中设有所述rtp的α阀、灌装组件、加塞组件以及轧盖组件；
29、所述α阀(6)位于所述无菌隔离器的内壁。
30、本技术中的所述灌装组件可为本领域常规的灌装组件。在某些实施方式中，所述灌装组件为自动灌装装置(7)。
31、本技术中的所述加塞组件可为本领域常规的加塞组件。在某些实施方式中，所述加塞组件为自动加塞装置(8)。
32、本技术中的所述轧盖组件可为本领域常规的轧盖组件。在某些实施方式中，所述轧盖组件为自动轧盖装置(9)。
33、在某些实施方式中，所述的无菌隔离器中于所述灌装组件、所述加塞组件以及所述轧盖组件的下方还设有输送带，用以传送尚未灌装或者已灌装有载体液的分装瓶(11)。
34、在某些实施方式中，在进行灌装时，所述灌装针的上游还设有第二蠕动泵(132)。
35、本技术中的所述分装瓶可为本领域中常规的分装瓶。在某些实施方式中，所述分装瓶为无菌分装瓶。
36、无菌分装载体液的方法
37、另一方面，本技术提供一种无菌分装载体液的方法，其包括使用本技术所述的载体液无菌分装系统进行分装。
38、在某些实施方式中，所述方法包括如下步骤：
39、1)将无菌隔离器进行灭菌处理；
40、2)将病毒载体液经一次性灌装单元通过rtp接口导入无菌隔离器；
41、3)进入无菌隔离器的载体液通过灌装组件分装至分装瓶；
42、4)使用加塞组件对分装瓶进行加塞；
43、5)使用轧盖组件对分装瓶进行封盖。
44、在某些实施方式中，步骤1)中所述灭菌为vhp灭菌。
45、在某些实施方式中，所述步骤2)包括将病毒载体液灌注到储液装置，并连接无菌连接器(45)。
46、在某些实施方式中，所述步骤2)包括将rtp的α阀(6)与β阀(31)连通。
47、在某些实施方式中，所述步骤3)包括监测缓冲装置(2)中的液位。在某些实施方式中，通过液位控制系统控制第一蠕动泵(131)。
48、在某些实施方式中，使用自动灌装装置(7)对加塞后的分装瓶(11)进行灌装。
49、在某些实施方式中，使用自动加塞装置(8)对装有载体液的分装瓶(11)进行加塞；
50、在某些实施方式中，使用自动轧盖装置(9)对加塞后的分装瓶(11)进行封盖。
51、在某些实施方式中，所述方法包括通过输送带将分装瓶(11)依次从自动灌装装置(7)输送到自动加塞装置(8)以及自动轧盖装置(9)。
52、使用本技术的载体液无菌分装系统将病毒载体液通过rtp接口通入无菌隔离器后使用自动分装设备进行无菌分装将病毒载体液分装至分装容器中，再使用加塞设备逐一对分装容器进行加塞，轧盖设备逐一对分装瓶进行封盖，整个过程均在无菌环境中进行，操作简易、生产效率高、不易污染、无菌有保障、且加样定量准确，有效增加生产效率，保证产品质量。其中设置的rtp接口，产品从接口导入，隔离器中物品可提前灭菌，减少产品分装前的准备时间，可以实现实时分装，减少病毒载体在室温下的存放时间，有效保证产品的质量。
53、此外，储液装置和缓冲装置在无菌隔离器外面，无需将装有产品的容器连同所有的分装工具一起进行vhp灭菌，既能节约生产准备时间，又避免了缓冲装置在隔离器中吸附h2o2进而对产品的质量产生影响。
技术实现思路