一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法
【专利摘要】本发明提供一种含紫杉烷提取物的植物盐，包括以下重量份的原料：紫杉烷提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份，所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17‰，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，所述盐地碱蓬植物盐，ca含量为2600~2700mg/kg，fe含量为690~700mg/kg；本发明还提供所述含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，包括层析步骤，所述层析步骤，石油醚?丙酮体积比1:5~100；本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，具有扩大小鼠对热刺激的痛阈值的作用，对dpph自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、过氧化氢的清除率高。
【专利说明】
一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法，属于植物盐提取工艺技 术领域。
【背景技术】
[0002] 紫杉又称红豆杉、赤柏松、常绿乔木，全身是宝，地栽高达25米，世界珍稀树种，是 世界上天然珍稀抗癌植物，是集观赏和药用于一身的珍贵树种。从植株中提取的紫杉烷提 取物具有抗癌作用，价格昂贵。因而，红豆杉也具有"生物黄金"之称。中药紫杉为红豆杉科 植物东北红豆杉的枝和叶。
[0003] 食盐的食用是人类进步的重要阶梯，长期以来人类依靠海水晒盐及井盐、岩盐开 采等方法制造食盐，满足自身需求。但人类长期食用的盐类基本上是无机物，只能满足人体 自身对无机盐的需求，难以适应由于生活水平提升造成的人类对多种功能食物的需求，特 别是目前市场上食盐基本为氯化钠，过高的na 摄入对人体的血压、血脂等均有明显的负面 影响。
[0004] 基于以上情况，目前印度率先在世界上利用海蓬子生产出植物盐，据报道，这种植 物盐富含钾、钙、镁、铁等微量元素，加工过程中无需添加任何化学物质，因此堪称"天然营 养盐"。
[0005] 盐地碱蓬是一年生草本积盐植物，植物学分类为藜科(chenopodiaceae)碱蓬属 (suaeda forsk. exscop)，主要生长于海滨、湖边、荒漠等处的盐碱荒地，是一种典型的盐碱 地指示植物，在渤海沿岸及新疆、内蒙等地的盐碱地区有着广泛的分布。我国共有碱蓬属植 物20种及1个变种，常见种为灰绿碱蓬（suaeda. glanca bunge)和盐地碱蓬（s. salsa(l.) pall)，产量最大的是灰绿碱蓬。目前对碱蓬属植物的研究主要集中在灰绿碱蓬、盐地碱蓬 及翅碱蓬。
[0006] 盐地碱蓬是世界上含盐量最高的草本植物之一，全盐量高达4.54%。在阴离子中， cl-占全盐的47.14%，在阳离子中，mg2 占全盐的20.04%，此外脂肪、蛋白质外，矿物质、微 量元素和维生素的含量丰富，适于进行植物盐生产开发，但目前相关部门尚未对这一问题 给予充分重视。如天津渤海沿岸地区大部分为高盐碱度的滩涂及湿地，极易适合碱蓬的生 长。长期以来，这些碱蓬自生自灭，一直没有引起人们的足够重视。
[0007] 现有技术存在以下缺陷： (1) 现有技术制备的植物盐，对小鼠对热刺激的痛阈值并没有明显扩大作用； (2) 现有技术制备的植物盐，抗氧化作用不明显； (3) 现有植物盐制备方法的紫杉烷提取物的制备中，紫杉烷的纯度低； (4) 现有植物盐制备方法的紫杉烷提取物的制备中，微生物含量高。
【发明内容】
[0008] 本发明为解决以上技术问题，提供一种含紫杉烷提取物的植物盐及其制备方法， 以实现以下发明目的： (1)本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，具有扩大小鼠对热刺激的痛阈值的作用。
[0009] (2 )本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，对dpph自由基、超氧阴离子自由基、 羟基自由基、过氧化氢的清除率高。
[0010] (3)本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，紫 杉烷纯度高。
[0011] (4)本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，微 生物含量低。
[0012]为解决以上技术问题，本发明采用的技术方案如下： 一种含紫杉烷提取物的植物盐，所述植物盐，原料包括紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物 盐。
[0013] 以下是对上述技术方案的进一步改进： 所述植物盐，包括以下重量份的原料:紫杉烷提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份。
[0014] 所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%。
[0015] 所述盐地碱蓬植物盐，ca含量为2600~2700mg/kg，fe含量为690~700mg/kg。
[0016] -种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，所述紫杉烷提取物的制备包括层析步 骤，所述层析步骤，吸附树脂柱柱高与直径比为5~10:1。
[0017] 所述层析步骤，石油醚-丙酮体积比1:5~100。
[0018] 所述层析步骤，洗脱流速为5.5~11.3ml/min。
[0019] 所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，用波长270~310nm的 紫外灯光源照射30~40min。
[0020] 所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，温度为-200-185°c。
[0021] 所述紫杉烷提取物的制备还包括酶解-超声波提取步骤，所述酶解-超声波提取， 酶解时间〇. 5~5h，酶解温度51~61°c。
[0022] 采用以上技术方案，本发明的有益效果为： (1)本发明的含紫杉烷提取物的植物盐，能扩大小鼠对热刺激的痛阈值，给予小鼠含紫 杉烷提取物的植物盐lmg/kgbw 7天，痛阈值为42.2~44. os，对照组痛阈值为15.1 s。
[0023] (2)本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，对dpph自由基清除率为61~63%;对超 氧阴离子自由基清除率为70~82%;对羟基自由基清除率为52~68%;对过氧化氢清除率为74~ 88% 〇
[0024] (3)本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，紫 杉烷纯度高，纯度为95.5~96.1%。
[0025] (4)本发明含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，紫杉烷提取物的制备方法中，微 生物含量低，微生物含量87~89cfu/g。
【具体实施方式】
[0026]以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用 于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
[0027]实施例1 一种含紫杉烷提取物的植物盐 以重量份计，包括以下原料组分： 紫杉烷提取物4份、盐地碱蓬植物盐6份。
[0028]所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，微生 物含量87~89cfu/g。
[0029] 所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%;钾含量为3.4~3.5%;黄酮含量为 2 · 6~2 · 7mg/g; ca 含量为 2600~2700mg/kg; fe 含量为690~700mg/kg。
[0030] 实施例2-种含紫杉烷提取物的植物盐 以重量份计，包括以下原料组分： 紫杉烷提取物3份、盐地碱蓬植物盐7份。
[0031] 所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，微生 物含量87~89cfu/g。
[0032] 所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%;钾含量为3.4~3.5%;黄酮含量为 2 · 6~2 · 7mg/g; ca 含量为 2600~2700mg/kg; fe 含量为690~700mg/kg。
[0033] 实施例3-种含紫杉烷提取物的植物盐 以重量份计，包括以下原料组分： 紫杉烷提取物2份、盐地碱蓬植物盐8份。
[0034]所述紫杉烷提取物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%，微生 物含量87~89cfu/g。
[0035] 所述盐地碱蓬植物盐，钠含量为15.20~15.30%;钾含量为3.4~3.5%;黄酮含量为 2 · 6~2 · 7mg/g; ca 含量为 2600~2700mg/kg; fe 含量为690~700mg/kg。
[0036] 实施例4 一种紫杉烷提取物的制备方法 包括以下步骤： (1)超声波粉碎 称取紫杉干燥树皮，切成长度2~3cm的段状，按重量比1:50的比例用lmmol/l、ph为6.8 的pbs缓冲液浸泡40~60min，充分溶胀； 在冰浴中用功率750~8201的超声波超声15~1911^11进行细胞破碎，破碎至0.5~2.5以111，得 粗提物。
[0037]所述紫杉干燥树皮的含水量为5.8~10.7%。
[0038] (2)破壁 将紫杉粗提物进行细胞破壁，所述低温气流破壁为紫外线辐射处理； 所述紫外灯辐射处理为在温度为-200-185°c下，用波长270~310nm的紫外灯光源照 射30~40min，使得细胞壁中的几丁质材质中的酰胺键吸收能量后断裂。
[0039] (3)酶解-超声波提取 将紫杉超微粉加水溶解，然后用复合酶制剂酶解； 加入水和药材质量的1%。~9%。的复合酶制剂进行酶解，酶解时间0.5~5h，酶解温度51~ 61°c，得紫杉酶解液； 经试验证明，用酶处理后可明显提高提取率，提取率提高了5~7%。
[0040]所述复合酶制剂的配比为纤维素酶质量分数50~70%，果胶酶质量分数为15~40%， 其余为木聚糖酶； 所述复合酶制剂的平均酶活为10000~30000单位； 对紫杉酶解液进行超声波提取，以水为溶剂，紫杉酶解液与水的料液比为1:2~60，以 超声波辅助提取，离心过滤后得提取液。
[0041 ] (4)超滤 所得提取液用截留分子量为5000~10000道尔顿的超滤膜超滤，取滤液。
[0042] 所述过滤温度为10~15°c，压力为0.051~o.impa。
[0043] (5)层析 滤液上样到大孔吸附树脂层析柱，除杂、洗脱，收集洗脱液。
[0044] 所述大孔吸附树脂层析柱的柱体积50ml，柱高与直径比为5:1，柱的使用压力为 0·6~0·7mpa〇
[0045] 先用iooml去离子水冲洗除杂，再以体积比1:5的石油醚-丙酮为洗脱液，5.5ml/ min的流速进行梯度洗脱。
[0046] (6)干燥 将洗脱液在60~80°c，压强为0.08~0.1 mpa下减压浓缩干燥至含水量小于等于5%，得紫 杉烷提取物。
[0047] 下述实施例5~实施例10是对实施例4所述紫杉烷提取物制备方法的优化，即：采用 实施例4的紫杉烷提取物的制备方法，只改变(5)层析步骤，对吸附树脂柱体积、乙醇浓度和 洗脱流速做多因素分析，采用常规方法对提取的紫杉烷提取物进行各项具体物质的含量进 行测定。
[0048] 表1吸附树脂柱柱高与直径比、石油醚-丙酮体积比和洗脱流速的多因素分析(实 施例5~实施例10)
由上述多因素分析试验可知，实施例6~实施例8是优选实施例，即吸附树脂柱柱高与直 径比为7~9:1，石油醚-丙酮体积比1:30~70和洗脱流速为8.8~9.7ml/min。
[0049] 实施例11 一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法 包括以下步骤： 一、紫杉烷提取物的制备 采用实施例4的紫杉烷提取物的制备方法，改变(5)层析步骤中的吸附树脂柱柱高与直 径比、石油醚-丙酮体积比和洗脱流速三个参数，改变为吸附树脂柱柱高与直径比为6.5~8: 1，石油醚-丙酮体积比1:30~70和洗脱流速为8.8~9.7ml/min，得到紫杉烷提取物。
[0050] 二、盐地碱蓬植物盐的提取 (1)酶解工艺 按碱蓬粉:水重量比为1:4~10的比例，放置于容器中，25~85°c下搅拌，按碱蓬重量 的0.3~1%加入复合酶酶解30~180min，完成后离心分离，收集上清液。
[0051 ]收集的上清液煮沸或调节ph，灭酶，离心收集上清液； 所述灭酶，灭酶方式优选为煮沸iomin。
[0052] 所述复合酶包括枯草芽孢杆菌蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶，重量配比为(6 ~12):(2~4):(1~3); 优选地，所述复合酶加入量为脱脂植物柏重量的0.4~0.8%，所述提取酶解温度为30°c ~80°c，所述浸提时间为60~150min。
[0053] (2)脱色 将提取液加热至55~65°c，滴加醋酸调节ph为6.5~7.5，加入絮凝剂，开启搅拌，搅拌 速率为180rpm，持续搅拌48~55min;经结晶干燥后，得盐地碱蓬植物盐。
[0054 ]所述絮凝剂加入量为提取液质量的8~11 %; 所述絮凝剂为壳聚糖、褐藻多糖、碳酸钙、酸性糖蛋白，按重量比5:2:1:1混合而成的 粉末； 所述壳聚糖，细度为100目，平均分子量为1225 da，脱乙酰度为94.28%，粘度为864 mpa.s 〇
[0055] 三、称量 按照配方称量紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物盐。
[0056] 四、混合 将称取好的紫杉烷提取物和盐地碱蓬植物盐搅拌、混合均匀，制成混合粉末，得含紫杉 烷提取物的植物盐。
[0057] 本发明含紫杉烷提取物的植物盐的应用效果： 1、本发明含紫杉烷提取物的植物盐对热刺激所致小鼠疼痛的影响 准备km小鼠，挑选热板上5s以后30s以内出现舔足的雌性小鼠80只，体重16~20g，随机 分为4组，分别为空白组、本发明实施例1组~实施例3组，每组10只。空白组作喂蒸馏水处理， 喂水量为lmg/kgbw，连续喂7天;实施例1组~实施例3组连续喂本发明实施例1~实施例3的含 紫杉烷提取物的植物盐7天，喂药量lmg/kgbw，试验时用秒表记录小鼠自放于热板上至出现 疼痛反应的时间，作为痛阈的指标。
[0058] 在喂药前先测定每只小鼠的痛阈值，给药25 min后分别测量小鼠的痛阈值，如小 鼠60s仍无反应将小鼠取出，其痛阈以60s计算。结果见表3。
[0059] 表3对热刺激所致小鼠疼痛的影响（土s)
表3结果表明，本发明实施例1组~实施例3组，与空白组比较，均能扩大小鼠对热刺激 的痛阈值。
[0060] 、本发明含紫杉烷提取物的植物盐的抗氧化作用 将本发明制备的含紫杉烷提取物的植物盐，配制成lmg/ml的溶液，采用常规方法测定 对dpph自由基清除率、对超氧阴离子自由基清除率、对羟基自由基清除率，对过氧化氢的清 除率，见表4。
[0061] 除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为重量百分数，本发明所述的比例，均 为质量比例;本发明中所述的给药，均为给本发明含有紫杉烷提取物的植物盐。
[0062] 最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可 以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的 保护范围之内。
【主权项】
1. 一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，所述植物盐，原料包括紫杉烷提取物和 盐地碱蓬植物盐。2. 根据权利要求1所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，包括以下重量份 的原料:紫杉烷提取物2~4份，盐地碱蓬植物盐6~8份。3. 根据权利要求1所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，所述紫杉烷提取 物，紫杉烷含量0.15~0.17%。，紫杉烷的纯度为95.5~96.1%。4. 根据权利要求1所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐，其特征在于，所述盐地碱蓬植 物盐，ca 含量为 2600~2700mg/kg，fe 含量为690~700mg/kg。5. -种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述紫杉烷提取物的制备 包括层析步骤，所述层析步骤，吸附树脂柱柱高与直径比为5~10:1。6. 根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，石油 醚-丙酮体积比1:5~100。7. 根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，洗脱 流速为5.5~11.31111^/111；[11 〇8. 根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所述 紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，用波长270~310nm的紫外灯光源照 射30~40min。9. 根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，其特 征在于，所述紫杉烷提取物的制备还包括破壁步骤，所述破壁步骤，温度为-200~-185°c。10. 根据权利要求5所述的一种含紫杉烷提取物的植物盐的制备方法，其特征在于，所 述紫杉烷提取物的制备还包括酶解-超声波提取步骤，所述酶解-超声波提取，酶解时间0.5 ~5h，酶解温度51~61°c。
【文档编号】a23l33/105gk105962287sq201610294041
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月3日
【发明人】王胜
【申请人】王胜